胰酶消化溶液

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胰酶消化溶液

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通过胰酶消化溶液的处理,使培养的细胞从贴壁状态转变为悬浮状态,用于临床体外诊断。

SKU: AI-VDG04 分类:
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描述

【产品名称】

通用名称:胰酶消化溶液

英文名称:Trypsin-EDTA

【包装规格】20mL/瓶,100mL/瓶

【预期用途】通过胰酶消化溶液的处理,使培养的细胞从贴壁状态转变为悬浮状态,用于临床体外诊断。

【检验原理】在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰酶消化溶液,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。

【主要组成成份】

组分名称含量比(%)
胰蛋白酶0.26
氯化钠0.8
氯化钾0.02
葡萄糖0.1
碳酸氢钠0.1
EDTA-Na20.041
酚红0.002

【储存条件及有效期】4-8℃保存, 有效期1个月;-20℃保存,有效期12个月。

【样本要求】本胰酶消化溶液要求样本不含有胰酶消化溶液抑制剂。

【检验方法】

  1. 贴壁细胞的消化:
  2. a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks缓冲液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
  3. b) 加入少量胰酶消化溶液,盖过细胞即可,室温放置 1-2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
  4. c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
  5. d) 如果发现消化不足,可加入胰酶消化溶液重新消化。
  6. e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
  7. 组织的消化:

不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

【阳性判断值或参考区间】样本活力70%(由台盼蓝染色法获得结论)。

【检验结果的解释】由于组织或细胞性质不同,需客户应依据具体情况,确定最佳消化时间及消化温度;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况。

【检验方法的局限性】本产品要求待测样本不含胰酶消化液抑制剂。

【产品性能指标】

pH                       7.0±0.5

渗透压                   280-340mOsmol/kg

内毒素                   ≤0.5EU/mL

无菌                     直接接种培养14天后培养基澄清

外观                     红色澄清注射水溶液

装量                     100mL±2mL

【注意事项】

  1.  本品仅用于体外诊断;
  2.  严禁使用过期产品;
  3.  不宜 4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;
  4.  为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本品无对人体有害物质,接触皮肤清水清洗即可,如进入人眼,需用大量清水冲洗,如果仍有不适需及时就医。
  5.  产品使用后按医疗废物处理。

备案人/生产企业名称:广州爱康生物技术有限公司

住所:广州市黄埔区瑞和路39号自编号G1座301至307

网址:www.brhealthcare.cn

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